Gebühr folgt

Für GDCh-Mitglieder

Noch kein Mitglied?

Gebühr folgt

Für Nichtmitglieder

Einführung in die HPLC

Basiskurs mit Experimenten

Kurs-ID: IH309

Themen-Highlights

Grundlagen der HPLC

Apparatur und Bedienung

Methoden- und Säulenwahl

Strategien zur optimalen Trennung

Detektieren und Quantifizieren

Ziele & Inhalte

Ziel des Kurses ist die Vermittlung von Zusammenhängen zwischen Theorie und Praxis der HPLC, verbunden mit praktischen Hinweisen zum apparativen Aufbau, zur Methodenentwicklung, zur Wahl der richtigen Trennsäule und optimaler Betriebsparameter. Die Vor- und Nachteile der verschiedenen Detektoren werden erläutert und demonstriert. Tipps und Tricks für die tägliche Routine sowie Troubleshooting-Hinweise ergänzen das Programm.


Schwerpunkte des Kurses sind:

  • Grundlagen der HPLC und ihre Anwendung zur Optimierung der Trennung
  • Trennsysteme (Normal-Phase-, Reversed-Phase-, Ionenpaar-Chromatographie) und Elutionstechniken (isokratische/Gradiententrennung)
  • Praktika zum „Anfassen“ und Kennenlernen der HPLC-Apparatur, zur Kontrolle von Selektivität und Effizienz und zur quantitativen Auswertung
  • Praktische Tipps und Troubleshooting
  • Moderne Packungsmaterialien und Säulentypen
  • Problemorientierte Säulenwahl (hohe Auflösung, hohe Geschwindigkeit, begrenzte Probemenge, LC-MS Kopplung)
  • Außersäuleneffekte und ihre Auswirkung auf die Trennung (Probenvorbereitung, Probenlösungsmittel, Probenvolumen, Verbindungskapillaren, Detektor)
  • Methodenentwicklung und Optimierung in der Reversed-Phase-Chromatographie
  • HPLC-Detektoren (Funktionsweise und Einsatzbereiche)
  • Quantifizierung (von der Peakflächenintegration und Kalibrierung zum richtigen Ergebnis)
  • Diskussion aktueller Trennprobleme und Beantwortung von Teilnehmendenfragen

Über die Kursleitung

Prof. Dr. Stefan Kalkhof

Hochschule für angewandte Wissenschaften Coburg

Stefan Kalkhof wurde 2016 als Professor für das Lehrgebiet Bioanalytik an der Hochschule Coburg berufen. Zudem leitet er die Arbeitsgruppe „Proteomik" des Fraunhofer-Instituts für Zelltherapie und Immunologie in Leipzig. Zuvor war Herr Kalkhof acht Jahre als Leiter der AG ,,Massenspektrometrie" am Helmholtz-Zentrum für Umweltforschung tätig. 

Methodisch liegt sein Schwerpunkt in der Methodenentwicklung der Identifizierung, Quantifizierung und Charakterisierung von Biomolekülen und deren Interaktionen mittels LC-MS.

Prof. Dr. Birgit Götzinger

Technische Hochschule Nürnberg

Prof. Dr. Birgit Götzinger ist seit 2014 Professorin für das Lehrgebiet Analytische Chemie an der Technischen Hochschule Nürnberg. Von 2011 bis 2014 war sie Professorin für Bioanalytik an der HAW Coburg und zuvor vier Jahre Projektleiterin bei der Firma Siegfried in Zofingen (Schweiz).
Ihre Interessengebiete umfassen die Methodenentwicklung für die Analytik kleiner Moleküle mit modernen Detektionsmethoden.

Das sagen unsere Teilnehmenden

Dr. Hartmut Kutzke

Dr. Hartmut Kutzke

Museum of Cultural History, University of Oslo

5.0

Sehr gute Einführung in die HPLC

Zeitplan

Möglicher Programmablauf für Ihre firmeninterne Schulung

Tag 1
09:30 Begrüßung und Vorstellung der Teilnehmenden
10:00  Grundlagen der HPLC, Informationen in einem Chromatogramm,
chromatographische Parameter
12:00  Mittagspause
13:15 Die HPLC-Apparatur: Besprechung und Demonstration der einzelnen
Komponenten direkt am Gerät
15:00  Praktische Übung zum Aufsetzen einer HPLC-Anlage mit anschließender
Testmessung zur Bestimmung von Basiskenngrößen eines Chromatogramms
17:00  Abschlussbesprechung und Diskussion
17:30  Voraussichtliches Ende des ersten Veranstaltungstages
19:00 Ausklang des ersten Seminartages in informeller Runde 
Tag 2
9:00  Trennprinzipien (Normalphase, Reversed Phase), Elutionstechniken
(isokratisch, Gradient, Wahl der mobilen Phase)
10:45 Grundlagen der HPLC-Methodenentwicklung und -optimierung,
Einflussfaktoren auf eine HPLC-Trennung: Selektivität, Trenneffizienz,
Auflösung
12:00  Mittagspause
13:15  Praktische Übung zu Reversed Phase Trennung und Elutionstechniken
15:40  Praktische Übungen und Simulationen zu Einflussfaktoren auf eine
HPLC-Trennung und zur Methodenoptimierung
17:00  Abschlussbesprechung
17:30  Voraussichtliches Ende des zweiten Veranstaltungstages
Tag 3
9:00  HPLC-Detektoren (Funktionsprinzip, Vor- und Nachteile, Einsatzgebiet) und
Quantifizierung in der HPLC
11:00  Qualitätskontrolle und Troubleshooting
12:45 Mittagspause
14:00  Demonstration HPLC-Detektoren sowie praktische Übungen zur
Quantifizierung
15:30  Praktische Übung/Demonstration zu Maßnahmen der Qualitätskontrolle und
Troubleshooting
17:00  Abschlussbesprechung
17:30  Voraussichtliches Ende des dritten Veranstaltungstages
18:00 Optionale Stadtführung 
Tag 4
9:00  LC-MS Kopplung
11:00  Aktuelle Entwicklungen (2D-LC, UPLC, Core Shell)
12:30 Mittagspause
13:30  Individuelle Fragestellungen: Themen und Vorkenntnisse werden vorab von
den Teilnehmenden abgefragt
15:00  Praktische Übung/Demonstration zu weiteren Trennmechanismen: u.a.
chirale Trennung, Normalphase, Peptidtrennung
17:00  Abschlussbesprechung
17:30  Voraussichtliches Ende der Veranstaltung 
Kaffeepausen werden vor Ort ergänzt.

Zielgruppe

Chemiker:innen, Lebensmittelchemiker:innen, andere Naturwissenschaftler:innen, chemisch-technische und biologisch-technische Mitarbeitende, die die HPLC bei der Lösung analytischer Fragestellungen in Forschung und Routine einsetzen möchten

Kontakt

Sie haben Fragen oder möchten Informationen?

Wir freuen uns auf Ihre Nachricht.

Kontakt

Sie haben Fragen oder möchten Informationen?

Wir freuen uns auf Ihre Nachricht.